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更新時間：2022-12-20 
瀏覽次數(shù)：759環(huán)氧-瓊脂糖凝膠FF的使用方法您知道嗎？
環(huán)氧-瓊脂糖凝膠FF是一種將環(huán)氧基團(tuán)鍵合在瓊脂糖微球上形成的活化層析分離介質(zhì)中間體。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有高活化基團(tuán)密度，適用于帶適用于氨基、羥基、巰基等基團(tuán)的配基的偶聯(lián)，偶聯(lián)效率高。
技術(shù)指標(biāo)：
外觀 | 乳白色半透明凝膠狀凝膠 |
基質(zhì) | 4%瓊脂糖凝膠 |
配體 | 環(huán)氧 |
配體密度 | ≥15 μmol/mL |
蛋白質(zhì)偶聯(lián)量 | ≥10 mg/ml IgG |
最大流速 | 300 cm/h |
耐反壓 | 0.3 MPa |
推薦流速 | 50 ~ 100 cm/h |
粒徑范圍 | 60 ~ 180μm |
工作溫度 | 4 ~ 40℃ |
基質(zhì)pH穩(wěn)定性 | 3 ~ 12（長時間）；2 ~ 14（短時間） |
基質(zhì)化學(xué)穩(wěn)定性 | 在以下溶液中穩(wěn)定：常用的水相緩沖液；1 mol/L NaOH；1 mol/L乙酸（pH 4.0）；6 mol/L鹽酸胍；70%乙醇。 |
使用方法：
1. 在配基偶聯(lián)前，準(zhǔn)備好所有的樣品、溶液、緩沖液等，盡量減少每一步操作之間的間隙。
2. 偶聯(lián)前用蒸餾水洗滌10個體積以上，去除保存液。
3. 根據(jù)目標(biāo)配基選擇偶聯(lián)溶液體系，一般情況下巰基偶聯(lián)pH為7 ~ 9，氨基偶聯(lián)pH為9 ~ 11，羥基偶聯(lián)pH為＞11。
4. 可以在20 ~ 40℃下偶聯(lián)，一般提高溫度能加速偶聯(lián)，在偶聯(lián)效果不好的情況下，可以提高溫度至35℃以上，但要考慮配基的穩(wěn)定性。
5. 偶聯(lián)時間依據(jù)反應(yīng)速度而定，通?？膳悸?lián)過夜（16 h）。
6. 偶聯(lián)配基后，剩余環(huán)氧基團(tuán)需要封閉，可用半胱氨酸、乙醇胺、甘氨酸等小分子試劑封閉數(shù)小時，如0.2 M Na2CO3, 0.1 M 乙醇胺, pH 10，37℃封閉16 h。
7. 偶聯(lián)完畢，用pH 8 ~ 9、0.1 mol/LTris-HCl緩沖液和pH 4 ~ 5、0.1 M醋酸-醋酸鈉緩沖液依次沖洗，循環(huán)三遍，去除未偶聯(lián)的殘留配基。
8. 偶聯(lián)后的凝膠可保存在含抑菌劑的溶液中，如20%乙醇。
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