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信帆生物告訴您:ELISA實驗樣本處理方法

更新時間:2018-05-07      瀏覽次數(shù):1428

信帆生物告訴您:ELISA實驗樣本處理方法

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elisa實驗的樣本處理方法如下:

液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

 1. 血清:

室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保 存過程中如有沉淀形成,應再次離心

2. 血漿:

應根據(jù)標本的要求選擇 EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20  鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3. 尿液:

用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀 形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

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4. 細胞培養(yǎng)上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。

5. 培養(yǎng)細胞

檢測細胞內(nèi)的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬/ml  右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘 左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

6. 組織標本

切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救?/span> 化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻 漿器將標本勻漿化。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢 測,其余冷凍備用。

組織勻漿,按照10%進行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液可以選取生理鹽水,也可以選取PBS,但一般是選PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.

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